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微滴式數字PCR的技術特點介紹與應用
點擊次數：62 更新時間：2025-01-06
微滴式數字PCR(Droplet Digital PCR，ddPCR)主要是通過對PCR反應體系進行液相的有限稀釋，將一個體系分割為數萬個以上皮升級的微滴。每個微滴即一個獨立的反應單元，每個反應單元所含的DNA模板分子個數符合泊松分布數學模型。最后，通過測定每個反應單元的熒光信號并結合泊松分布，可以計算出測定樣本的絕對拷貝數。
微滴式數字PCR技術特點：
高通量：微滴式數字PCR儀能夠同時處理多個樣品，每個樣品又被分割成成千上萬個微滴進行反應，從而實現了高通量的基因分析。
高靈敏度：該技術能夠識別并放大非常低濃度的靶標核酸，即使樣本中病毒的含量極低，也可以通過這一技術進行有效檢測。這種高靈敏度使其成為檢測低豐度樣本的理想工具。
絕對定量能力：微滴式數字PCR不依賴內參基因或標準曲線進行定量分析，而是直接計算每個微滴中陽性反應的比例，從而提供樣本中靶標分子的絕對數量。這簡化了定量分析過程，減少了潛在的誤差，保障了數據的精確性。
減少干擾，提高一致性：由于每個微滴是一個獨立的反應單元，這一設計有效減少了PCR抑制劑的影響，并防止了不同核酸分子擴增產物之間的相互干擾。因此，微滴式數字PCR的結果一致性和重復性較高，是確保數據可靠性的有效技術手段。
應用領域：
疾病相關分子標記物檢測：微滴式數字PCR儀可用于檢測與疾病相關的分子標記物，如腫瘤標志物、遺傳病相關基因等。
稀有突變序列檢測：該技術能夠準確檢測樣本中含量極低的稀有突變序列，為遺傳病診斷、腫瘤早期篩查等提供有力支持。
病原微生物檢測：微滴式數字PCR儀可用于檢測各種病原微生物，如病毒、細菌、真菌等，為感染性疾病的診斷和治療提供重要依據。
食品安全及轉基因成分檢測：該技術可用于檢測食品中的轉基因成分、農藥殘留、添加劑等有害物質，確保食品的安全性和合規性。
拷貝數變異遺傳分析：微滴式數字PCR儀可用于分析基因拷貝數變異，為遺傳病研究、基因治療等提供重要信息。
基因表達分析：該技術可用于研究基因在不同條件下的表達水平，為基因功能研究、藥物篩選等提供有力支持。
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